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Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的五種使用方法

 更新時間:2022-11-02    點擊量:1299
  Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒提供了一種簡單、可靠、快速的方法可以從細胞和容易研磨的動物組織中提取高質(zhì)量的RNA,為一些提取困難的標本(例如脂肪組織)提供了很好的解決方案。純化的RNA可以隨時使用,非常適合對低量DNA污染敏感的下游應(yīng)用,如實時熒光定量PCR。不需要通過氯仿分層,只需五步即可從各種組織中快速提取高質(zhì)量的RNA,安全無毒,環(huán)保健康。
 
  Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的五種使用方法:
 
  一.CTAB法
 
  CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法,CTAB是一種陽離子去污劑,它能與核酸形成復(fù)合物,這些復(fù)合物在低鹽溶液中會因溶解度的降低而沉淀,而在高鹽溶液中可解離,從而使DNA和多糖分開,再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在該法中使用的聚維酮(PVP)與多酚結(jié)合形成復(fù)合物,從而可有效避免多酚類化合物影響DNA降解。
 
  二.SDS法
 
  相比于CTAB,SDS法更加方便簡單。近年來科研者們提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解細胞使其釋放出DNA的方法,后續(xù)的DNA純化過程中通常采用酚/氯仿處理,但對于植物DNA純化不是一個很好的選擇,因為酚的使用可降低DNA的提取效率和純度。實驗證明,若采用較大的離心力和較長的離心時間,然后用氯仿一異戊醇代替酚來去除變性蛋白質(zhì),可以克服由于酚的摻入及殘留對以后酶切帶來的困難。
 
  三.氯化節(jié)法
 
  氯化節(jié)法的提取獲得率較高。原因可能為氯化節(jié)不僅與植物細胞壁上的多糖經(jīng)基反應(yīng)生成醚,而且與細胞液中多糖物質(zhì)反應(yīng)破壞糖鏈,有利于DNA的釋放和提純。
 
  四.高鹽低pH法
 
  高鹽低pH法是指以無機鹽和異丙烯為提純試劑提取DNA的方法。通常采用的無機鹽為低pH的醋酸鉀,用來沉淀蛋白質(zhì)。該方法方便省時,所需樣品量少。
 
  五.果膠酶法
 
  利用果膠酶對植物破碎細胞進行抽提的一種技術(shù)。
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